Nyckelskillnad - hybridisering in situ mot immunhistokemi
Diagnos av cancer och infektionssjukdomar är en populär trend där nya proteomik- och genombaserade tekniker används för att identifiera tumörer eller infektiösa celler, dess spridning och platserna för cellutveckling och analysera den genetiska grunden för mest smittsamma och icke-smittsamma sjukdomar. Detta kommer att resultera i noggrann bearbetning och design av läkemedel och i utveckling av skräddarsydda terapier för sjukdomar. In situ-hybridisering (ISH) och immunhistokemi (IHC) är två sådana allmänt använda tekniker inom cancerbiologi och nyckelskillnaden mellan in situ-hybridisering och immunokemi ligger i molekylerna som används i analysförfarandet. I ISH används nukleinsyrasonderna vid analys medan i IHC används monoklonala och polyklonala antikroppar för de diagnostiska bestämningarna.
INNEHÅLL
1. Översikt och nyckelskillnad
2. Vad är in situ-hybridisering
3. Vad är immunhistokemi
4. Likheter mellan in situ-hybridisering och immunhistokemi
5. Jämförelse sida vid sida - Hybridisering in situ mot immunhistokemi i tabellform
6. Sammanfattning
Vad är in situ-hybridisering (ISH)?
In situ-hybridisering är en nukleinsyrahybridiseringsteknik som utförs direkt på en del eller en sektion av vävnad, i hela vävnaden eller i celler. Tekniken beror på teorin om Watson Crick kompletterande basparning, vilket resulterar i antingen DNA-DNA-hybrider eller DNA-RNA-hybrider som kan detektera muterade gener eller identifiera den nödvändiga genen av intresse. Enkelsträngade DNA-sekvenser, dubbelsträngade DNA-sekvenser, enkelsträngade RNA-sekvenser eller syntetiska oligonukleotidsekvenser används som sönder under hybridiseringsteknik, och dessa sönder är märkta med en radioaktiv fosfor vid dess 5'-ände för identifieringsprocedurer vid autoradiografi eller märks med användning av fluorescerande färgämnen. Det finns olika typer av ISH-tekniker tillgängliga baserat på vilken typ av sond som används och vilken typ av visualiseringsteknik som följs.
Figur 01: Fluorescerande in situ-hybridisering
Det finns många tillämpningar av ISH, främst inom molekylär diagnostik av infektionssjukdomar för att identifiera förekomsten av patogener och för att bekräfta patogenen via molekylär diagnostik. Det används också inom utvecklingsbiologi, karyotypning och fylogenetisk analys och fysisk kartläggning av kromosomer.
Vad är immunhistokemi (IHC)?
I tekniken för IHC är den analyserade huvudmolekylen antigenet. Under IHC används monoklonala och polyklonala antikroppar för att bestämma närvaron av antigener vid infektion eller malign cellproliferationsstatus. Tekniken är baserad på antigen-antikroppsbindning och enzymmärken används för denna teknik; en sådan applikation är ELISA (enzymlänkad immunosorbentanalys). Markörerna kan också vara fluorescerande märkta antikroppar eller radiomärkta antikroppar.
Figur 02: Immunhistokemi
IHC används ofta för detektion av cancerceller. De diagnostiska procedurerna riktar sig mot de antigener som finns på tumörcellerna för att identifiera och karakterisera tumören. Samma procedur är införlivad för att diagnostisera smittsamma medel. Monoklonala och polyklonala antikroppar används också för att analysera olika genprodukter genom att möjliggöra antikropp-antigenbindningsreaktionen mellan det önskade proteinet och den syntetiska antikroppen som administreras.
Vad är likheterna mellan in situ-hybridisering och immunhistokemi?
- ISH och IHC är mycket specifika reaktioner.
- Båda teknikerna är mycket noggranna.
- Båda teknikerna kan användas i diagnostik för cancer och infektionssjukdomar.
- Dessa tekniker utförs i sterila in vitro-miljöer.
- Båda är snabba tekniker som ger reproducerbara resultat.
- ISH och IHC använder detektionsmetoder som radiomärkning och fluorescensmetoder.
Vad är skillnaden mellan in situ-hybridisering och immunhistokemi?
Skilja artikeln mitt före bordet
Hybridisering på plats mot immunhistokemi |
|
| ISH är en nukleinsyrahybridiseringsteknik som utförs direkt på en del eller en sektion av vävnad eller hela vävnaden. | IHC är en teknik där monoklonala och polyklonala antikroppar används för att bestämma närvaron av antigener, vilka är speciella proteinmarkörer placerade på cellytorna. |
| Analyserad typ av biomolekyler | |
| ISH analyserar nukleinsyror. | IHC analyserar proteiner-antigener. |
| Grund för biokemisk reaktion | |
| Kompletterande basparning mellan DNA-DNA eller DNA-RNA sker i denna teknik. | Antigen-antikroppsinteraktioner är involverade i immunhistokemi. |
| Enzymkopplade detektionsmetoder | |
| Enzymlänkade detekteringsmetoder kan inte användas i ISH. | Enzymlänkade detektionsmetoder kan användas i IHC. |
Sammanfattning - Hybridisering in situ mot immunhistokemi
Molekylär diagnostik är snabba och bekräftande metoder som kan användas för att identifiera en icke-överförbar sjukdom såsom cancer eller smittsam sjukdom såsom HIV eller tuberkulos baserat på de molekylära markörer som finns på cellerna som leder till manifestationen av sjukdomen. Molekylära markörer kan vara närvarande i form av uttryckta proteiner eller på den genetiska nivån baserad på vilken olika nya tekniker införs för att öka effektiviteten och är mindre mödosamma, även om det är höga kostnader för dessa tekniker. Således beror ISH på DNA-DNA eller DNA-RNA hybridbildning, och IHC beror på de specifika reaktionerna mellan antikropp och antigen. Detta är skillnaden mellan in situ hybridisering.
Ladda ner PDF-version av In situ-hybridisering mot immunhistokemi
Du kan ladda ner PDF-versionen av den här artikeln och använda den för offlineändamål enligt citat. Vänligen ladda ner PDF-versionen här Skillnaden mellan in situ-hybridisering och immunhistokemi.
