Nyckelskillnad - kapillärelektrofores vs gelelektrofores
Elektrofores är en teknik som används för att separera biomolekyler baserat på partikelladdning, partikelstorlek och partikelform. Migrering av molekylen, känd som elektroforetisk rörlighet, beror på vilken typ av polymer / gel som används, dess porstorlek, den spänning som tillhandahålls, driftstid och förhållandet mellan yta och volym. Det finns olika typer av elektroforestekniker baserat på vilken typ av biomolekyl som används. Den första typen av elektrofores som uppfanns var papperselektrofores där ett nitrocellulosapapper användes som medium för separation av biomolekyler. Principen för gelelektrofores där geler med olika porstorlek användes för att separera biomolekyler uppfanns senare. Gelelektroforesteknik modifierades ytterligare för att förbättra noggrannheten hos tekniken, och en sådan modifiering är kapillärelektrofores. Huvudskillnaden mellan kapillärelektrofores och gelelektrofores är att gelelektrofores utförs i ett vertikalt eller horisontellt plan med användning av en polymergel med standardporstorlek medan kapillärelektrofores utförs i ett kapillärrör med en polymervätska eller en gel.
INNEHÅLL
1. Översikt och nyckelskillnad
2. Vad är gelelektrofores
3. Vad är kapillärelektrofores
4. Likheter mellan kapillärelektrofores och gelelektrofores
5. Jämförelse sida vid sida - Kapillärelektrofores mot gelelektrofores i tabellform
6. Sammanfattning
Vad är gelelektrofores?
Gelelektrofores är en teknik som används för att separera huvudsakligen nukleinsyror, proteiner eller aminosyror baserat på dess laddning, storlek och form. Denna teknik använder en fysisk gel, som är en polymer substans, som separationsmedium. Oftast använda geler är agaros (för nukleinsyraseparation) och polyakrylamid (för proteinseparation). Gelelektroforetisk apparat innehåller gelgjutningsbrickan för att förbereda gelen, gjutningskammar för att förbereda brunnarna, buffertank, elektroder - positiva (anod) och negativa (katod) och spänningsmatningsenheten. Molekyler som DNA eller RNA, som är negativt laddade, rör sig från katoden till anoden och molekyler som är positivt laddade rör sig tvärtom. Gelberedning görs enligt kravet. Om en hög upplösning eller separering av molekyler krävs,en gel med hög koncentration med mindre porstorlek bör framställas. Molekylerna separerade på gelmatrisen observeras efter en färgningsteknik. De separerade molekylerna visas som band på gelmatrisen.
Figur 01: Gelelektrofores
Gelelektrofores används i molekylär diagnostik såsom DNA-fingeravtryck för att bestämma närvaron av ett visst DNA / RNA-fragment eller ett protein. Gelelektrofores bestämmer också renheten för det extraherade biomolekylprovet. Gelelektrofores utförs som ett preliminärt steg för in- och hybridisering och som en bekräftande analys efter sekvensering.
Vad är kapillärelektrofores?
Kapillärelektrofores är en modifiering av gelelektrofores som använder samma separationsprincip baserat på laddning, molekylens storlek, men utförs i ett kapillärrör med antingen en gelsubstans eller en flytande polymer. Kapillärer är framställda av smält kiseldioxid och varje kapillärrör har en innerdiameter på 50-100 μm och är 25-100 cm lång. Prover injiceras i kapillärröret innehållande polymermaterialet och separeras mycket snabbt än den konventionella gelelektroforesen. Kapillärsystemet är väl skyddat inuti en isoleringsmantel som skyddar provet från kontaminering. Kapillärer kan fyllas med flytande polymerer såsom hydroxietylcellulosa eller högupplösta geler såsom polyakrylamid. Kapillärelektrofores ger större upplösning; därmed är separationen mer exakt. Kapillärelektrofores använder ett automatiserat detektorsystem via spektrofotometrisk analys. Detta beror på förhållandet mellan högre yta och volym.
Figur 02: kapillärelektrofores
Kapillärelektrofores används i situationer som i kriminalteknik där högre noggrannhet krävs och inte ofta används eftersom det är kostsam teknik.
Vad är likheterna mellan kapillärelektrofores och gelelektrofores?
- Separation av molekyler i båda teknikerna baseras på laddningen och storleken på molekylen.
- Båda teknikerna kan användas för att separera både nukleinsyror och proteiner.
- Provvolymen för båda teknikerna är densamma.
- Båda teknikerna använder en buffert för att underlätta separering.
Vad är skillnaden mellan kapillärelektrofores och gelelektrofores?
Skilja artikeln mitt före bordet
Kapillärelektrofores vs gelelektrofores |
|
| Kapillärelektrofores är en teknik som separerar biomolekyler på ett kapillärrör med användning av ett flytande eller gelpolymermedium. | Gelelektrofores är en teknik som separerar biomolekyler i ett vertikalt eller horisontellt plan med användning av ett polymergelmedium. |
| Separation | |
| Vid kapillärelektrofores sker separering inuti ett kapillärrör. | Vid gelelektrofores sker separering i vertikalt eller horisontellt plan. |
| Separationsmedium | |
| Flytande polymerer som hydroxietylcellulosa används vid kapillärelektrofores. | Geler, antingen agaros eller polyakrylamid, används som medium vid gelelektrofores. |
| Tvärbindning | |
| Hög upplösning kan erhållas från kapillärelektrofores. | Upplösningen har låg gelelektrofores. |
| Yta till volymförhållande | |
| Förhållandet yta till volym har hög kapillärelektrofores. | Förhållandet yta till volym har låg gelelektrofores. |
| Detekteringsteknik | |
| Detektering görs genom spektrofotometriska automatiserade detektorer i kapillärelektrofores. | Färgning och observation genom UV-transilluminator görs som detekteringstekniker i gelelektrofores. |
Sammanfattning - Kapillärelektrofores mot gelelektrofores
Molekylär diagnostik spelar en viktig roll i den vetenskapliga världen. Identifiering och rening av DNA, RNA och proteiner är kritiska steg i diagnostiska procedurer. Elektrofores är en teknik som separerar och identifierar biomolekyler i både gelelektrofores och den mycket avancerade kapillärgelelektroforesen. Gelelektrofores utförs i ett vertikalt eller horisontellt plan med användning av en polymergel med standard porstorlek medan kapillärelektrofores utförs i ett kapillärrör med en polymervätska eller en gel. Detta är skillnaden mellan kapillärelektrofores och gelelektrofores. Efter avslutad elektroforesteknik bearbetas biomolekylerna ytterligare för att erhålla information på högre nivå via hybridisering eller genom tekniker såsom fingeravtryck.
Ladda ner PDF-version av kapillärelektrofores vs gelelektrofores
Du kan ladda ner PDF-versionen av den här artikeln och använda den för offlineändamål enligt citat. Ladda ner PDF-version här Skillnaden mellan gelelektrofores och kapillärelektrofores.
