Nyckelskillnad - RNASE A vs RNASE H
Ribonukleaserna är nukleaser som specifikt bryter ner RNA till mindre enheter. De kan delas in i två kategorier; endoribonukleaser och exoribonukleaser. Endoribonukleas är ett endonukleas som antingen kan bryta ner enkelsträngat eller dubbelsträngat RNA. Det klyver fosfodiesterbindningarna i en RNA-polynukleotidkedja. Exemplen är RNas A, RNas III, RNas T1, RNas P och RNas H. Exoribonukleas är ett exonukleas som bryter ned RNA genom att avlägsna terminala nukleotider från antingen 5'-änden eller 3'-änden av RNA-molekylen. Exemplen är RNas R, RNas II, RNas D och RNas PH. Huvudskillnaden mellan RNASE A och RNASE H är att RNase A är ett bukspottkörtelribonukleas som specifikt bryter ner enkelsträngat RNA i mindre komponenter medan RNase H är ett icke-specifikt enzym som klyver RNA i RNA-DNA-hybrid i mindre enheter via den hydrolytiska mekanismen.
INNEHÅLL
1. Översikt och nyckeldifferens
2. Vad är RNASE A
3. Vad är RNASE H
4. Likheter mellan RNASE A och RNASE H
5. Jämförelse sida vid sida - RNASE A vs RNASE H i tabellform
6. Sammanfattning
Vad är RNASE A?
RNas A är ett bukspottkörtelribonukleas som specifikt klyver de oparade cytosin- och uracilresterna vid 3'-änden av enkelsträngat RNA. RNas H arbetar vid en högre saltkoncentration (0,3 M eller högre NaCl-koncentration). Den hydrolytiska reaktionen är två steg. Det bildar en 3 'fosforylerad produkt via 2', 3 'cyklisk monofosfatmellanprodukt. Även om det är specifikt för enkelsträngat RNA vid högre saltkoncentration, kan det också bryta ned dubbelsträngat RNA och RNA i RNA-DNA-hybrid vid lägre NaCl-koncentration (lägre än 0,3 M NaCl).
Bruce Merrifield syntetiserade först detta enzym. RNas A är ett mycket populärt enzym inom molekylär forskning. Bovint pankreas RNas A är ett exempel på RNas A. Och det är ett av de hårdaste enzymerna som används i laboratoriet. Detta enzym behöver inte en kofaktor för sin aktivitet. Det är ett mycket termostabilt enzym. RNas A är det första enzymet och det tredje proteinet till vilket en korrekt aminosyrasekvens detekterades. Detta enzym är mycket litet med 124 aminosyror och en molekylvikt på 12600 da. Och den har fyra histidinrester (His 12 och His 119 som involverar en katalytisk reaktion).
Figur 01: RNase A
RNas A kan isoleras genom att koka ett råprov. Vid kokning försämras alla andra enzymer kvarvarande RNas A. RNas A är ett otroligt stabilt enzym. Detta enzym inhiberar med ribonukleasinhibitorprotein, tungmetall och uridinvanadatkomplex.
Vad är RNase H?
RNas H är ett ospecifikt ribonukleasenzym som kan bryta ner RNA i RNA-DNA-hybrid via hydrolytisk reaktion. RNas H klyver 3'- OP-bindningen av RNA i en RNA-DNA-hybrid. I slutändan producerar det 3'OH och 5 'fosfatavslutade produkter. Vid DNA-replikering spelar den en central roll genom att ta bort RNA-primer efter att nya DNA-strängar har bildats. Under laboratorieförhållanden försämras det specifikt RNA i RNA-DNA-hybrid men inte DNA och ohybridiserat RNA. Och detta enzym används vanligtvis för att förstöra RNA-mallen efter att den första komplementära DNA-strängen bildats under cDNA-syntes.
Figur 02: RNase H
RNase H använder också i nukleasskyddsanalyser. Det kan också införlivas för avlägsnande av poly A-svans från mRNA. RNase H har förmågan att förstöra det icke-kodande RNA i och utanför cellen. Metalljoner krävs som medfaktorer för denna proteinaktivitet. En kelator (EDTA) kan användas för att hämma enzymet RNase H.
Vad är likheterna mellan RNASE A och RNASE H?
- Båda är av proteiner.
- Båda är endoribonukleas
- Båda kan bryta ner RNA.
- Båda utför hydrolytiska reaktioner.
- Molekylära laboratorier använder båda dessa.
Vad är skillnaden mellan RNASE A och RNASE H?
Skilja artikeln mitt före bordet
RNASE A vs RNASE H |
|
| RNas A är ett bukspottkörtelribonukleas som specifikt klyver 3'-änden av oparad cytosin- och uracilrester av enkelsträngat RNA vid högre saltkoncentration. | RNas H är ett ospecifikt ribonukleasenzym som kan bryta ner RNA i RNA-DNA-hybrid via hydrolytisk reaktion. |
| Typ av RNA-klyvning | |
| RNas A klyver specifikt enkelsträngat RNA vid högre saltkoncentration. | RNas H klyver RNA i RNA-DNA-hybrid. |
| Behov av medfaktorer för aktivitet | |
| RNase A behöver inte kofaktorer för sin aktivitet. | RNase H behöver metalljoner som medfaktorer för sin aktivitet. |
| Hämmare av proteinaktivitet | |
| Ribonukleasinhibitorprotein, tungmetall och uridin-vanadat-komplex hämmar RNAse A-aktiviteten. | En chelator (EDTA) hämmar RNas H-aktivitet. |
| Borttagning av RNA-primer i DNA-replikering | |
| RNas A används inte för att ta bort RNA-primer vid DNA-replikering. | RNas H används för att ta bort RNA-primer vid DNA-replikation |
| Borttagning av DNA-mall i komplementär DNA-syntes (C-DNA) | |
| RNas A används inte för RNA-mallavlägsnande under komplementär DNA (C-DNA) syntes. | RNas H används för borttagning av RNA-mallar under komplementär DNA (C-DNA) syntes. |
| Avlägsnande av Poly-A-Tail i mRNA hybridiserat till Oligo (dt) | |
| RNas A används inte för att avlägsna "poly-A-svans" i mRNA hybridiserat till oligo (dt). | RNas H används för att avlägsna "poly-A-svans" i mRNA hybridiserat till oligo (dt) |
Sammanfattning - RNASE A vs RNASE H
Ribonukleaserna är nukleasenzymer som har förmågan att klyva RNA i mindre enheter. De är två typer; endoribonukleaser och exoribonukleaser. Endoribonukleas är ett endonukleas som har förmågan att bryta ner enkelsträngat eller dubbelsträngat RNA. Och det klyver fosfodiesterbindningen i en RNA-polynukleotidkedja. RNas A och RNas H är två endoribonukleaser. RNas A är ett bukspottkörtelribonukleas som specifikt klyver oparad cytosin- och uracilrester vid 3'-änden av det enkelsträngade RNA vid högre saltkoncentration. RNas H är ett ospecifikt ribonukleasenzym som kan bryta ner RNA i RNA-DNA-hybrid via hydrolytisk reaktion. Detta är skillnaden mellan RNase A och RNase H.
Ladda ner PDF RNASE A vs RNASE H
Du kan ladda ner PDF-versionen av den här artikeln och använda den för offlineändamål enligt citat. Ladda ner PDF-version här Skillnaden mellan RNASE A och RNASE H
