Nyckelskillnad - HPLC vs HPTLC
Huvudskillnaden mellan HPLC och HPTLC är att HPLC tillåter kvantitativ separation av komponenter i ett prov medan HPTLC inte tillåter kvantitativ separation av komponenter i ett prov.
Kromatografi är en fysisk separationsmetod som används för att separera och identifiera komponenterna i en blandning. Både HPLC och HPTLC är kromatografiska tekniker. HPLC är högpresterande vätskekromatografi. HPTLC är högpresterande tunnskiktskromatografi.
INNEHÅLL
1. Översikt och nyckeldifferens
2. Vad är HPLC
3. Vad är HPTLC
4. Jämförelse sida vid sida - HPLC vs HPTLC i tabellform
5. Sammanfattning
Vad är HPLC?
HPLC är högpresterande vätskekromatografi. Det är en analytisk teknik som används för att separera, identifiera och kvantifiera komponenter i en blandning. I denna teknik löses provet i ett lämpligt lösningsmedel. Därefter leds lösningsmedlet med provet genom en pump med ett givet tryck. Pumpen är fylld med fast adsorberande material. Sedan binder vissa komponenter starkt till det absorberande materialet medan andra komponenter binder löst. Detta gör att komponenterna har olika flödeshastigheter genom pumpen. Därför kan komponenterna separeras enkelt.
Figur 01: Ett HPLC-system
Det adsorberande materialet som fyller pumpen kallas den stationära fasen. Lösningsmedlet med det upplösta provet är känt som den mobila fasen. Pumpen som används i denna teknik kallas kolumnen. Kolonnen är fylld med ett adsorberande material, oftast kiseldioxidpartiklar. Storleken på dessa partiklar kan variera från 2-50 μm. Separationsprocessen påverkas av sammansättningen av den mobila fasen och systemets temperatur. Interaktionerna mellan den stationära fasen och komponenten i provet kan vara hydrofoba interaktioner, dipol-dipolinteraktioner, jonbindning, etc.
Driftstrycket för HPLC är betydligt högre än för traditionell vätskekromatografi. Den ligger runt 50-350 bar. Skillnaden mellan vätskekromatografi och HPLC är att vid vätskekromatografi faller provet genom kolonnen under tyngdkraft, medan i HPLC trycksätts provet genom kolonnen. Kolonnens storlek och de absorberande partiklarna är också mycket små jämfört med traditionell vätskekromatografi. Upplösningen med HPLC-tekniken är dock överlägsen.
Vad är HPTLC?
HPTLC är högpresterande tunnskiktskromatografi. Det är den avancerade och automatiserade formen av traditionell TLC. Denna teknik ger en effektiv upplösning under en kort tidsperiod. I denna analysmetod kan provet och en referens analyseras samtidigt, vilket gör att provet kan jämföras med referensen. Det ger en förbättrad analytisk noggrannhet än andra kromatografiska tekniker. Det tar mindre tid för analysen. Tekniken är en billig teknik.
Figur 02: En analys av livsmedelsfärgämnen med HPTLC
HPTLC-metoden är en enkel process, och provberedningssteget elimineras också (i traditionell TLC ingår provberedningssteget före separationen. Detta steg innefattar rengöring och anrikning). Lösningsmedlet kan användas direkt utan någon förbehandling även om andra kromatografiska tekniker kräver förbehandlingar såsom avgasning, filtrering etc.
Det adsorberande materialet som används i HPTLC är kiseldioxid med mycket små partikelstorlekar. I traditionell TLC är partikelstorleken på kiseldioxid 5-20 μm medan det i HPTLC är 4-8 μm. Provet appliceras på HPTLC-plattan med en applikator. Det ger en enhetlig och säker applikation. Därefter placeras plattorna i en kammare som har den mobila fasen. Kammaren bör vara mättad med ångan från den mobila fasen. Efter HPTLC-processen kan de fläckar som har flyttats upptäckas. Vid upptäckt av fläckarna på plattan använder HPTLC-tekniken en lämplig UV-region eller en jodkammare.
Vad är skillnaden mellan HPLC och HPTLC?
Skilja artikeln mitt före bordet
HPLC vs HPTLC |
|
| HPLC är högpresterande vätskekromatografi. | HPTLC är högpresterande tunnskiktskromatografi. |
| Metod | |
| I HPLC passeras den mobila fasen med lösningsmedlet genom en kolonn fylld med den stationära fasen. | I HPTLC upptäcks provet på en TLC-platta och placeras i en kammare som innehåller den mobila fasen; därefter får provet migrera uppåt plattan tillsammans med mobilfasen. |
| Mått | |
| I HPLC används skillnaderna mellan komponenternas flödeshastigheter genom kolonnen för att separera komponenterna i provet. | I HPTLC används skillnaderna mellan de avstånd som varje komponent har rest i provet för att separera komponenterna i provet. |
| Kvantitativ separering | |
| HPLC tillåter kvantitativ separation av komponenter i ett prov. | HPTLC tillåter inte kvantitativ separation av komponenter i ett prov. |
Sammanfattning - HPLC vs HPTLC
HPLC och HPTLC är två kromatografiska tekniker. Huvudskillnaden mellan HPLC och HPTLC är att HPLC tillåter kvantitativ separation av komponenter i ett prov medan HPTLC inte tillåter kvantitativ separation av komponenter i ett prov.
