Nyckelskillnad - HPLC vs LCMS
Låt oss först titta på innebörden av HPLC och LCMS innan vi analyserar skillnaden mellan HPLC och LCMS. Kromatografi är en separationsteknik i kemisk analys där provkomponenter separeras under passage genom ett kromatografiskt medium. Det involverar också interaktion med provet, den stationära fasen och den mobila fasen. HPLC står för High Performance Liquid Chromatography, och det används som en vätskekromatografimetod i analytisk kemi. Kombinationen av vätskekromatografi och masspektroskopi (LCMS) har utvecklats för kvantitativ analys av utvalda biomolekyler och det är en mycket känslig, exakt och specifik analysförfarande jämfört med HPLC. Detta är nyckelskillnaden mellan HPLC och LCMC. Den här artikeln presenterar dig för HPLC och LCMC som behandlar kemisk analys och diskuterar skillnaderna mellan HPLC och LCMS.
Vad är HPLC?
Högpresterande vätskekromatografi (HPLC) är en populär separationsteknik inom analytisk kemi. Den används främst för att separera komponenterna, för att identifiera och kvantifiera varje komponent i en blandning. Tidigare var denna metod känd som högtrycksvätskekromatografi eftersom den berodde på pumpar för att flöda ett trycksatt flytande lösningsmedel innefattande provblandningen genom en kolonn packad med ett fast adsorberande material. Varje beståndsdel i provblandningen samverkar olika med det fasta adsorberande materialet, vilket resulterar i olika flödeshastigheter för olika beståndsdelar. Detta kan leda till separering av beståndsdelarna när de strömmar ut från HPLC-kolonnen.
HPLC har använts för olika applikationer såsom analys av vitamin D-nivåer i blod, olaglig läkemedelsanvändning av idrottare genom att detektera läkemedelsresterna i urinen, sortera ut beståndsdelarna i ett komplext biologiskt prov för forskningsändamål och analys och tillverkning av läkemedel.
Vad är LCMS?
Vätskekromatografi – masspektrometri (LCMS) är en analytisk teknik som kombinerar de fysiska separationsförmågan hos vätskekromatografi med massanalysförmågan hos masspektrometri (MS). Vätskekromatografi är en separationsteknik och masspektrometri används för att analysera mass-till-laddningsförhållandet mellan laddade partiklar. Den fysiska separationen uppnås vanligtvis med HPLC och alternativt LCMS även känd som HPLC-MS. LCMS är en dominerande analytisk teknik som har mycket hög noggrannhet, känslighet och specificitet jämfört med HPLC. Således är det användbart i många applikationer såsom forskningsändamål, läkemedelsanalys, livsmedelsanalys etc. LCMS används huvudsakligen för att separera, för att detektera, identifiera och kvantifiera biokemiska egenskaper hos ett visst prov i närvaro av komplexa kemiska blandningar.
Vad är skillnaden mellan HPLC och LCMC?
Akronym och definition av HPLC och LCMC
HPLC: HPLC står för högpresterande vätskekromatografi. Det är en separationsteknik som huvudsakligen används för att separera komponenterna, för att identifiera och kvantifiera varje komponent i en blandning.
LCMS: LCMS står för vätskekromatografi och masspektrometri. Det är en analytisk teknik som kombinerar den fysiska separationsförmågan hos vätskekromatografi med massanalysförmågan hos masspektrometri (MS).
Kännetecken för HPLC och LCMC
Klassificering
HPLC: Detta är endast en vätskekromatografimetod.
LCMS: Detta är en kombination av vätskekromatografimetoden och masspektrometri-metoden.
Effektivitet
HPLC: Jämfört med LCMS är HPLC-analysen mindre effektiv och långsammare.
LCMS: Jämfört med HPLC är LCMS-analysen effektiv och snabbare.
Känslighet
HPLC: Jämfört med LCMS är HPLC-analysen mindre känslig.
LCMS: Jämfört med HPLC är LCMS-analysen mer känslig.
Specificitet
HPLC: Jämfört med LCMS är HPLC-analysen mindre specifik.
LCMS: Jämfört med HPLC är LCMS-analysen mer specifik.
Noggrannhet
HPLC: HPLC ger mindre exakta resultat än LCMS för bestämning av vissa kemikalier.
LCMS: LCMS ger mer exakta resultat än HPLC för bestämning av vissa kemikalier.
Komponent
HPLC: HPLC kan betraktas som en komponent i LCMS.
LCMS: LCMS kan inte betraktas som en del av HPLC.
Ionkälla
HPLC: Jonkälla finns inte i HPLC-instrument.
LCMS: Ionkällan finns i LCMS-instrumentet.
Applikationer
HPLC: Joner, polymerer, organiska molekyler och biomolekyler kan analyseras med HPLC.
LCMS: Organiska molekyler och biomolekyler kan analyseras. I motsats till HPLC kan LCMS användas för att undersöka ofullständigt upplösta blandningar.
Drift
HPLC: Diagrammet för ett HPLC-instrument ges i figur 1 och innehåller vanligtvis en autosampler, pumpar och en detektor. Provtagaren introducerar provblandningen i den mobila fasen (trycksatt blandning av lösningsmedel såsom vatten, acetonitril och / eller metanol) som överför den till kolonnen. Pumparna levererar önskat flöde och sammansättning av den mobila fasen genom kolonnen. Kolonnen är fylld med adsorbenten, som är en kornig fast partikel, såsom kiseldioxid eller polymerer. Detektorn alstrar en signal som är proportionell mot mängden provkomponentens närvaro i kolonnen, vilket möjliggör kvantifierbar analys av de valda provkomponenterna. HPLC-instrumentet styrs och dataanalys tillhandahålls av en digital mikroprocessor och användarprogramvara.
Figur 1: Diagram över HPLC-instrument
LCMS: Diagrammet för LCMS-instrumentet ges i figur 2. Provextraktet sätts in i kolonnen bestående av HPLC. Denna kolumn behåller provmetaboliter baserat på fysiska karaktärer och olika metaboliter flyter till masspektrometern vid olika tidsintervall. Masspektroskopi används för att bedöma massor av partiklar, för att bestämma elementens arrangemang av en molekyl och för att klargöra molekylstrukturerna. Emellertid bör provet joniseras för att generera laddade molekyler för att bestämma deras förhållande mellan massa och laddning. Därför, i stället för HPLC-instrument, består LCMS ytterligare tre moduler som järnkälla, en massanalysator och en detektor. En jonkälla kan omvandla gasfasprov till joner och en massanalysator som grupperar jonerna efter sina massor med hjälp av elektromagnetiska fält. Till sist,en detektor kvantifierar värdena och levererar data för varje jon som finns i provet. LCMS-tekniken kan användas för både kvalitativa och kvantitativa applikationer.
Figur 2: Diagram över LCMS-instrument
Sammanfattningsvis är HPLC en vätskekromatografimetod medan LCMS är en kombination av vätskekromatografi och masspektrometri. Båda dessa analystekniker har olika egenskaper, men de kan användas för att identifiera och kvantifiera livsmedelskompositioner, läkemedel och andra bioaktiva molekyler.