Nyckelskillnad - YAC vs BAC-vektorer
Vektorer används vid molekylär kloning. En vektor kan definieras som en DNA-molekyl som beter sig som ett medel för att bära främmande genetiskt material in i en annan cell. En vektor som innehåller främmande DNA är känd som rekombinant DNA och den bör ha förmågan att replikera och uttrycka det i värdorganismen. Jäst artificiell kromosom (YAC) och bakteriell artificiell kromosom (BAC) är två typer av vektorer involverade i kloning. Nyckelskillnaden mellan YAC och BAC är att YAC är ett artificiellt konstruerat vektorsystem som använder en specifik region av jästkromosom för att infoga stora segment av genetiska material i jästceller medan BAC är ett artificiellt konstruerat vektorsystem med användning av en specifik region av E. coli-kromosom. för att infoga stora DNA-segment i E. coli-celler.
INNEHÅLL
1. Översikt och nyckeldifferens
2. Vad är YAC-vektorer
3. Vad är BAC-vektorer
4. Jämförelse sida vid sida - YAC jämfört med BAC-vektorer
5. Sammanfattning
Vad är YAC-vektorer?
YAC (jäst artificiell kromosom) är en artificiellt byggd kromosom som har förmågan att bära ett stort segment av främmande DNA och replikera i jästcellerna. Den har en centromer, telomerer såväl som autonomt replikerande sekvenser som är väsentliga för replikering och stabilitet. YAC bör också ha en selektiv markör eller markörer och restriktionsställen för att göra den till en effektiv kloningsvektor. En stor sekvens som sträcker sig från 1000 kb till 2000 kb kan införas i YAC och överföras till jäst. Transformationseffektiviteten för YAC är mycket låg.
Figur 01: YAC-vektor
Vad är BAC-vektorer?
Bakteriell artificiell kromosom (BAC) är en artificiellt konstruerad kromosom för molekylär kloning. Den har specifika regioner av E. coli F plasmid och den är cirkulär och superlindad. BAC är utvecklat för att klona DNA-fragment till bakterier, särskilt till E. coli. Den kan bära DNA-fragment med storlekar upp till 300 kb. Jämfört med YAC har BAC-kloningsinsatser mindre storlek. BAC utvecklades 1992 och det är fortfarande populärt på grund av dess stabilitet och enkel konstruktion. BAC är också användbara för att utveckla vacciner.
Figur 02: BAC-vektor i molekylär kloning
Vad är skillnaden mellan YAC- och BAC-vektorer?
Skilja artikeln mitt före bordet
YAC vs BAC-vektorer |
|
| YAC är en genetiskt konstruerad kromosom med användning av jäst-DNA för kloning. | BAC är en genetiskt konstruerad DNA-molekyl som använder E. coli DNA för kloning. |
| Kön | |
| YAC: er utformades för att klona stora fragment av genomiskt DNA i jäst. | BAC utvecklades för kloning av stora genomfragment i Escherichia coli. |
| Infoga längd | |
| YAC kan innehålla genombaserade megabasstorlekar (1000 kb - 2000 kb). | BAC kan bära inlägg på 200–300 kb eller mindre. |
| Konstruktion | |
| YAC-DNA är svårt att rena intakt och kräver hög koncentration för att generera YAC-vektorsystem. | BAC är lätt att rena intakt och kan enkelt konstrueras. |
| Chimerism | |
| YAC är ofta chimära. | BAC är sällan chimära. |
| Stabilitet | |
| YAC är instabil. | BAC är stabil. |
| Ändringar | |
| Jästrekombination är mycket genomförbar och förblir alltid aktiv. Därför kan det generera raderingar och andra omläggningar i en YAC. | E. coli-rekombination förhindras och slås på vid behov. Därför minskar det oönskade omläggningar i BAC. |
| Underhåll | |
| Manipulering av rekombinanta YAC kräver vanligtvis att YAC överförs till E. coli för efterföljande manipulation. Därför är det en mödosam process. | BAC-modifiering sker direkt i E. coli. Så det finns inget behov av DNA-överföring. Processen är därför inte mödosam. |
Sammanfattning - YAC vs BAC-vektorer
YAC har blivit ett viktigt forskningsverktyg vid kloning av processer på grund av dess förmåga att klona stora fragment av DNA i värdorganismen. Emellertid har YAC flera nackdelar som vektorer såsom konstruktionsvårigheter, chimerism, instabilitet, etc. För att övervinna dessa problem har forskare utvecklat BAC-vektorer. BAC har konstruerats med användning av specifika regioner av E. coli-kromosom. Det är en stabil vektor och kan enkelt konstrueras. Längden på DNA som BAC kan hantera är dock upp till 20 gånger mindre än för YAC. Detta är skillnaden mellan YAC- och BAC-vektorsystem. Numera är BAC mer föredragen framför YAC i laboratorierna.
