Nyckelskillnad - övergående vs stabil transfektion
Transfektion är en process som är involverad i genöverföringen av eukaryota celler med kemiska eller fysiska metoder. Transfektion kan klassificeras i två huvudtyper som heter transient transfektion och stabil transfektion. Under transient transfektion kan genen av intresse inte integreras med värdgenomet och uttrycks temporärt inom värden på kort sikt, medan genen av intresse i stabil transfektion integreras med värdgenomet och upprätthålls under lång tid i flera generationer. Detta är nyckelskillnaden mellan övergående och stabil transfektion. I båda fallen är transfektion framgångsrik och gener uttrycks.
INNEHÅLL
1. Översikt och nyckelskillnad
2. Vad är transient transfektion
3. Vad är stabil transfektion
4. Jämförelse sida vid sida - Transient vs stabil transfektion
5. Sammanfattning
Vad är transient transfektion?
Transfektion är ett viktigt verktyg för att infoga gener i eukaryota celler. Bland de två typerna av transfektion är transient transfektion ett vanligt sätt vid genöverföring. Genom en vektor transformeras främmande gener inuti värdceller. När främmande DNA kommer in i värdcellen har det två alternativ. Det kan antingen integreras med värdgenomet och replikera, eller stanna inne utan att integreras i genomet. Transient transfektion uppvisar det tillfälliga uttrycket av de insatta generna utan att integreras i värdgenomet. Gener uttrycker och producerar det kodade proteinet tills cellen delar sig. Men på grund av oförmågan att integrera kan den inte replikera och komma in i framtida generationer. Denna typ av transfektion är framgångsrik under en kort tidsperiod. Under celldelningen eller på grund av andra faktorer utsätts främmande DNA för nedbrytning. Transient transfektion visas när främmande DNA är i form av högt lindat DNA.
Figur 01: Transient transfektion
Vad är stabil transfektion?
Stabil transfektion visar framgångsrik utländsk genintegration i värdgenomet. När främmande DNA kommer in i värdcellen integreras en del av det främmande DNA med värdgenomet och blir en del av det. Följaktligen replikerar främmande DNA också och övergår till framtida generationer när värdgenomet replikeras. Denna typ av transfektion är komplex och sällsynt. Men på grund av den stabila transfektionen i genomet upprätthålls denna egenskap under en längre period på flera generationer.
Stabil transfektion är en svår process och kräver en effektiv leverans av DNA och cellförvärv av främmande DNA till dess genom. Följaktligen gynnar linjär DNA den stabila transfektionen än cirkulär DNA. Emellertid är stabil transfektionshastighet ungefär en av 104 transformerade celler. Stabil transfektion kan observeras genom samtransfomering av en valbar markör och genomföra det artificiella urvalet på ett medium.
Figur 02: Stabil transfektion
Vad är skillnaden mellan transient och stabil transfektion?
Skilja artikeln mitt före bordet
Övergående vs stabil transfektion |
|
| Utländskt DNA integreras inte i ett värdgenom. | Utländskt DNA integreras med värdgenomet och blir en del av det. |
| Replikering inom värden | |
| Transient transfekterade gener replikeras inte inom värden. Därför överförs inte gener till nästa generationer. | Gener replikeras inom värden och överförs till kommande generationer. |
| Genuttryckets tidsvaraktighet | |
| Gener uttrycks under en begränsad tidsperiod och därefter förstörs de. | Gener blir en del av genomet och uttrycks inom generationen under en lång tidsperiod. |
| Använda sig av | |
| Detta är användbart för att studera effekterna av kortvarigt uttryck av gener eller genprodukter. | Detta är användbart för att studera effekterna av genuttryck på lång sikt. |
| Detektering av transfektionen | |
| Gener uttrycks och kan lätt detekteras genom att infoga en reportergen. | Stabil transfektion kan lätt detekteras genom att infoga en valbar markör och välja genom artificiellt urval på media. |
| Förekomst och process | |
| Transient transfektion är vanlig och inte komplex att utföra. | Stabil transfektion är sällsynt och är komplex att utföra. |
| DNA: s natur | |
| Mycket superlindat DNA är lämpligt för transient transfektion. | Linjärt DNA är lämpligt för stabil transfektion. |
| Applikationer | |
| Detta används för studier av gennedslag eller tystnad med hämmande RNA, proteinproduktion i liten skala | Detta används för proteinproduktion i storskaliga, långsiktiga farmakologiska studier, genterapi, forskning om mekanismerna för långvarig genetisk reglering |
Sammanfattning - Transient vs Stable Transfection
Transienta och stabila transfektioner är två typer av transfektioner som visas under genen som överförs till eukaryota celler av icke-virala baserade system. Transformerat främmande DNA är inte integrerat med värdgenomet i transient transfektion medan det integreras med värdgenomet i stabil transfektion. Cirkulärt lindat DNA visas transient transfektion medan linjärt DNA föredrar stabil transfektion. Detta är skillnaden mellan övergående och stabil transfektion. Övergående transfektion är dock vanligare och lättare jämfört med stabil transfektion. Men valet av en bland två beror på syftet med genöverföringen och forskningsprojektets varaktighet.
