Nyckelskillnad - Gram Stain vs Culture
Gramfärgning är en färgningsteknik som utförs för att differentiera bakterier i två grupper beroende på tjockleken på peptidoglykanskiktet i deras cellvägg. Kultur är en metod för odling och underhåll av mikroorganismer under laboratorieförhållanden för olika analyser. Den viktigaste skillnaden mellan gramfläck och kultur är deras funktion; gram-stam en färgningsteknik av bakterier där odling är en metod för odling och underhåll av mikroorganismer.
INNEHÅLL
1. Översikt och nyckelskillnad
2. Vad är Gram Stain
3. Vad är Culture
4. Jämförelse sida vid sida - Gram Stain vs Culture
5. Sammanfattning
Vad är Gram Stain?
Gramfärgning är en viktig differentiell färgningsteknik som används för bakterieidentifiering i mikrobiologi. Denna teknik introducerades av den danska bakteriologen Hans Christian Gram 1884. Gramfärgning kategoriserar bakterier i två huvudgrupper: grampositiva och gramnegativa; dessa är mycket viktiga vid bakterieklassificering och identifiering. Gramfärgning utförs som ett första steg för bakteriekarakterisering.
Bakterier grupperas baserat på skillnaderna i deras cellvägg. Grampositiva bakterier innehåller ett tjockt peptidoglykanlager i cellväggen medan gramnegativa bakterier innehåller ett tunt peptidoglykanlager i sin cellvägg som visas i figur 01. Resultatet av gramfärgningen kommer att baseras på tjockleksskillnaden i peptidoglykanlagret i cellvägg.
Figur 1: Grampositiva bakterier och gramnegativa bakterier
Gramfärgning utförs med användning av fyra olika reagens, nämligen; primär fläck, mordant, avfärgningsmedel och motfläck. Kristallviolett och safranin fungerar som primär- och motfärgningar, medan gramjod respektive 95% alkohol tjänar som mordant respektive avfärgningsmedel.
Grundläggande steg för Grams Stain
- En bakteriell utstrykning bereds på ett rent glas, värmefixeras och kyls.
- Smuts översvämmas med kristallviolett i 1-2 minuter.
- Smuts sköljs med långsamt rinnande kranvatten för att avlägsna överflödiga fläckar.
- Gramjod appliceras på utstrykningen i 1 minut.
- Smuts sköljs med långsamt rinnande vatten
- Smet tvättas med 95% alkohol i 2-5 sekunder och sköljs med långsamt rinnande kranvatten.
- Smet är kontrafläckat med safranin i 1 minut
- Smuts sköljs med långsamt rinnande kranvatten, torkas och observeras under mikroskopet.
I slutet av gramfärgen kommer gramnegativa bakterier att observeras i rosa färg medan de grampositiva bakterierna kommer att observeras i lila färg som visas i figur 02. Resultatet av gramfärgen bestäms av tjockleken på peptidoglykanlagret i deras cellvägg. Under avfärgningssteget avlägsnas lätt den primära fläcken och mordanten från de gramnegativa bakterierna och blir färglösa eftersom de har ett tunt peptidoglykanlager. Den primära fläcken kvarhålls i de gram-positiva bakterierna eftersom de har ett tjockt peptidoglykanskikt. Motfläckar kommer inte att vara effektiva för gram-positiva bakterier på grund av kvarhållningen av den primära fläcken. Så gram-positiva bakterier kommer att vara synliga i primär färgfärg, dvs purpurfärgad. Motfärgning fläckar de gramnegativa bakterierna och kommer att synas i plockfärgen som är safraninfärgen. Därför är det lätt att kategorisera bakterier i två grupper efter gramfläcken och det är värdefullt vid bakteriedifferentiering och identifiering.
Figur 2: gramstam
Vad är kultur?
Mikrobiell odling är en metod för odling och underhåll av mikroorganismer under laboratorieförhållanden för olika ändamål. Kulturer odlas i fasta, halvfasta och flytande media baserat på typen och syftet med mikroorganismodlingen. Kulturer förses med nödvändiga näringsämnen och tillväxtförhållanden som krävs av mikroorganismerna. Det finns olika komponenter i ett odlingsmedium såsom energikälla, kolkälla, kvävekälla, mineraler, mikronäringsämnen, vatten, stelningsmedel etc. Optimal temperatur, syre och pH bör justeras beroende på vilken typ av mikroorganism som odlas.
Det finns olika typer av mikrobiella kulturer; till exempel satsvis odling, kontinuerlig odling, stabkultur, agarplattkultur, buljongkultur etc. Enligt kompositionen av odlingsmediet finns det olika typer av odlingsmedier kända som syntetiska medier, halvsyntetiska medier och naturliga medier. Mikrobiella kulturer bereds under sterila förhållanden i en speciell kammare som kallas laminärt luftflöde. Odlingsmedium och glasvaran steriliseras före ympning av den önskade mikroorganismen. Under korrekta sterila betingelser överförs målmikroorganism till det steriliserade näringsmediet och inkuberas vid optimal temperatur. Inuti mediet kommer mikroorganismen att växa och föröka sig med hjälp av de medföljande näringsämnena.
Figur 3: En bakteriekultur på plattan
Vad är skillnaden mellan Gram Stain och Culture?
Skilja artikeln mitt före bordet
Gram Stain vs Culture |
|
| Grams stam är en differentiell färgningsteknik som används för bakteriedifferentiering och identifiering. | Mikrobiell kultur är en metod för att odla mikroorganismer i laboratoriet. |
| Komponenter | |
| Detta använder olika reagens inklusive två fläckar. | Detta använder olika odlingsmedier som fasta, halvfasta och flytande medier som består av näringsämnen och andra nödvändiga förhållanden. |
| Grundläggande funktioner | |
| Detta möjliggör gruppering av bakterier i två grupper: gram negativ och gram positiv. | Detta möjliggör multiplikation av mikroorganismer för olika ändamål. |
| Bas | |
| Gramfärgsutfallet baseras på skillnaderna i peptidoglykanlagret i cellväggen. | Mikroorganismer kommer att växa och föröka sig inom kulturmediet. |
| Resultat | |
| Gramnegativa bakterier är synliga i rosa färg och gram-positiva bakterier är synliga i lila färg. | På plattor kan man se kolonier av mikroorganismerna. På flytande media är mikroorganismer i suspenderad form. |
Sammanfattning - Gram Stain vs Culture
Mikrobiella kulturer bereds och underhålls under laboratorieförhållanden för olika ändamål, såsom lagring, testning, kemisk rening etc. Gramsfärgning är ett färgningsförfarande som differentierar bakterier i två huvudgrupper som kallas gramnegativa bakterier och gram-positiva bakterier. Därför är skillnaden mellan gramfärgen och kulturen att gramfärgning är en färgningsteknik av bakterier medan odlingen är en metod för odling och underhåll av mikroorganismer i laboratorierna.
