Nyckelskillnad - Gram Stain vs Acid Fast
Bakterier är mycket små mikroorganismer. De är transparenta och deras upptäckt är svårt under levande och ofärgade förhållanden. Således utvecklas olika färgningsmetoder för att underlätta detektering av bakterier. Det finns tre huvudtyper av färgningstekniker: enkel färgning, differentiell färgning och strukturell färgning. Differentiell färgning är en teknik som använder mer än en fläck för att differentiera bakterier. Gramfläck och syrafast fläck är mest populärt känd som differentiella fläckar. Gramfärgning är en differentiell färgningsteknik som separerar bakterier i två grupper som kallas gram-positiva bakterier och gramnegativa bakterier. Den syrafasta fläcken är en differentiell fläck som används för att identifiera syrafasta organismer såsom Mycobacterium från icke-sura snabba organismer. Detta är nyckelskillnaden mellan Gram-fläck och Acid Fast-fläck.
INNEHÅLL
1. Översikt och nyckelskillnad
2. Vad är gramfärg
3. Vad är syra snabbt
4. Likheter mellan gramfärg och syrafast
5. Jämförelse sida vid sida - Gramfärg vs syrafast i tabellform
6. Sammanfattning
Vad är Gram Stain?
Gramfärgning är en viktig differentiell färgningsteknik som används för bakterieidentifiering i mikrobiologi. Denna teknik introducerades av den danska bakteriologen Hans Christian Gram 1884. Gramfärgning kategoriserar bakterier i två huvudgrupper som heter grampositiva och gramnegativa, vilket är mycket viktigt för bakterieklassificering och identifiering. Mikrobiologer utför gramfärgning som ett första steg i bakteriekarakterisering under sina studier.
Bakterier grupperas baserat på skillnaderna i deras cellvägg. Grampositiva bakterier består av ett tjockt peptidoglykanskikt i deras cellvägg medan gramnegativa bakterier består av ett tunt peptidoglykanlager i deras cellvägg. Resultatet av gramfärgningen kommer att baseras på skillnaden i tjockleken på cellväggens peptidoglykanskikt.
Gramfärgning utförs med användning av fyra olika reagens, nämligen; primär fläck, mordant, avfärgningsmedel och motfläck. Kristallviolett och safranin används som primär- och motfläckar, medan gram jod respektive 95% alkohol används som släckmedel respektive avfärgningsmedel. De grundläggande stegen för gramfläck är följande;
- En bakteriell utstrykning bereds på ett rent glas, värmefixeras och kyls.
- Smuts översvämmas med kristallviolett i 1-2 minuter.
- Smuts sköljs med långsamt rinnande kranvatten för att avlägsna överflödiga fläckar.
- Gramjod appliceras på utstrykningen i 1 minut.
- Smuts sköljs med långsamt rinnande vatten
- Smet tvättas med 95% alkohol i 2-5 sekunder och sköljs med långsamt rinnande kranvatten.
- Smet är kontrafläckat med safranin i 1 minut
- Smuts sköljs med långsamt rinnande kranvatten, torkas och observeras under mikroskopet.
I slutet av gramfärgen observeras gramnegativa bakterier i rosa färg medan grampositiva bakterier observeras i lila färg.
Figur 01: Gramnegativa och Gram-positiva bakterier
Resultatet av gramfläcken bestäms av tjockleken på peptidoglykanlagret i deras cellvägg. Under avfärgningssteget avlägsnas lätt den primära fläcken och mordanten från de gramnegativa bakterierna och blir färglösa eftersom de har ett tunt peptidoglykanlager. Den primära fläcken bibehålls i de grampositiva bakterierna eftersom de har ett tjockt peptidoglykanskikt. Motfläcken kommer inte att vara effektiv för grampositiva bakterier på grund av kvarhållningen av den primära fläcken. Således kommer gram-positiva bakterier att vara synliga i primär färgfärg, det vill säga lila. Motfläcken fläckar de gramnegativa bakterierna och de kommer att synas i plockfärg, vilket är safraninfärgen. Därför är det lätt att kategorisera bakterier i två grupper efter gramfläck och det är värdefullt vid bakteriedifferentiering och identifiering.
Vad är syra snabbt?
Syrafasthet är en fysisk egenskap hos vissa bakterier, särskilt deras motståndskraft mot avfärgning av syror under färgningsprocedurer. När de har färgats motstår dessa organismer utspädda syra- eller etanolbaserade avfärgningsförfaranden som är vanliga i många färgningsprotokoll. Således ges namnet "surt snabbt" till dessa organismer. Denna egenskap visas på grund av att de har en hög nivå av vaxartat material (myolsyra) i sina cellväggar. Detta test är avgörande för identifiering av Mycobacterium tuberculosis.
Figur 2: Syra snabba mykobakterier
Denna syrafasta fläck utvecklades av Paul Ehrlich 1882. Ehrlichs syrafasta teknik modifierades av Ziehl-Neelsen och används nu oftare. Syra snabb färgningsprocedur involverar tre olika reagens. Carbol fuschin används som den primära fläcken. Syraalkohol används som avfärgningsmedel. Metylenblått används som motfläck. Färgningsproceduren utförs enligt följande.
- Den primära fläcken (carbol fuchsin) appliceras på det fasta provet på objektglaset (Alla celler färgas i röd färg).
- Sliden värms upp genom ångning i 5 minuter vilket driver fläckarna ordentligt in i cellerna.
- Därefter tillsätts avfärgningslösningen (Detta tar bort det röda färgämnet från alla celler utom de syrafasta bakterierna).
- Metylenblått tillsätts som en motfläck (det färgar alla avfärgade bakterieceller).
- Syrafasta bakterier förblir röda medan icke-sura snabba bakterier fläckar i blått.
Vad är likheterna mellan Gram Stain och Acid Fast?
- Gramfärg och syrafast är två olika färgningstekniker.
- Båda teknikerna kategoriserar bakterier i två grupper.
- Båda teknikerna använder två fläckar och en avfärgning.
Vad är skillnaden mellan Gram Stain och Acid Fast?
Skilja artikeln mitt före bordet
Gram Stain vs Acid Fast |
|
| Gramfärgning är en differentiell färgningsteknik som separerar bakterier i två grupper Gram-positiva bakterier och Gram-negativa bakterier. | Syrafast fläck är en differentiell fläck som används för att identifiera syrafasta organismer från icke-sura snabba organismer. |
| Primär fläck | |
| Kristallviolett är den vanligaste primära fläcken vid gramfärgning. | Carbol fuchsin är den primära fläcken som används i syra snabbt. |
| Avfärgningsmedel | |
| 95% alkohol används som avfärgningsmedel i gramfläck. | Syraalkohol används som avfärgningsmedel i syrafast. |
| Counter Stain | |
| Gramfläck använder safranin som motfläck. | Syra snabb fläck använder metylenblått som motfläck. |
| Observation | |
| Gramnegativa bakterier observeras i plockfärg och grampositiva bakterier observeras i lila färg. | Syrafasta bakterier observeras i röd färg och icke syrasnabba bakterier observeras i blå färg. |
Sammanfattning - Gram Stain vs Acid Fast
Visualisering av mikroorganismer i levande tillstånd är svårt. Därför används biologiska fläckar och färgningsförfaranden i stor utsträckning för att studera deras egenskaper. Differentiell färgning är en typ av färgningsteknik som används för att differentiera bakterier. Gramfärg och syrafast fläck är två olika färgningstekniker. Gramfärgning differentierar gramnegativa bakterier och grampositiva bakterier baserat på cellväggarnas tjocklek. Syrafast färgning skiljer sura bakterier från icke-sura bakterier baserat på mykolsyrainnehållet i cellväggen. Detta är skillnaden mellan syrafast och gramfläck.
Ladda ner PDF-version av Gram Stain vs Acid Fast
Du kan ladda ner PDF-versionen av den här artikeln och använda den för offlineändamål enligt citat. Vänligen ladda ner PDF-versionen här Skillnaden mellan Gram Stain och Acid Fast.
